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外源基因導入真核細胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉染法、DEAE-葡聚糖轉染法、脂質體法、電穿孔法、顯微注射法等,2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉染,其主要成分為HEPES,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,能有效控制pH值在6.8~8.2范圍,尤其在pH7.2~7.4具有較好的緩沖能力,終濃度一般為10~50mmol/L,培養液內含20mmol/LHEPES即可達到較好的緩沖能力。
Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細胞轉染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其pH值為7.05~7.12,經過濾除菌處理;影響磷酸鈣轉染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細胞上停留的時間、休克時間;Leagene 2×HeBS要求DNA濃度在10~50μg為宜,Hela、BALB等細胞沉淀放置16h,CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉染效率。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。